微生物检测的检验方法小结

    微生物检测方法一：沉降法

    将盛有培养基的平皿放在空气中暴露一定时间，经培养后计算出其上所生长的菌落数。此法简单，使用普遍，由于只有一定大小的颗粒在一定时间内才能降到培养基上，因此，所测得微生物数量欠准确，检验结果比实际存在数量少，并且也无法测定空气质量，所以，仅能粗略计算空气污染及了解被测趣味生物的种类。

    【检验方法】

    （1）将一直被好的营养琼脂、查氏培养基及高氏1号三种平板置于待测地点，打开皿盖在空气中暴露5~10min。

    （2）盖上培养皿盖，置于℃培养24~45h，根据平板上所生长的菌落数计算出1m?或1L空气中的细菌总数。

    （3）计算，奥梅梁斯基认为：在面积为100cm2平板琼脂培养基表面上，5min降落的细菌数经37℃培养24h后生长的菌落数和10L空气中所含的细菌数相当。根据奥氏公式计算

    式中X—每1m?空气中的细菌个数；

    式中N—5min降落在平板上，经37℃培养24h后生长的菌落数；

    式中r—平皿底半径。

    经测定发现，用奥氏公式计算的浮游细菌数比实测的浮游细菌少。原因是此公式没有考虑尘埃粒子大小、数量、气流情况、人员密度和活动情况。

    微生物检测方法二：撞击法

    以缝隙采样器为例，用吸风机或真空泵江含菌空气以一定流速穿过狭缝而被抽吸到营养琼脂培养及平板上。狭缝长度为平皿的半径，平板与缝的间隙有2㎜，平板以一定的转速旋转。通常平板转动一周，取出置于37℃恒温箱中培养的48h，根据空气中微生物的密度可调节平板状动的速度。采集含菌高的空气样品时，平板转动的速度要比含菌zui低的空气样品的转速快。根据取样时间和空气流量算出单位空气中的含菌量。采样器的规格各国不一，可按说明书操作。

    微生物检测方法三：过滤法

    该法是抽取定量空气通过一种液体吸收剂，然后取此液体定量培养计数出菌落数。

    （1）将无菌的液体培养基或无菌水与真空泵相连，以每分钟10L速度取空气样并剧烈震荡，使阻流在液体中的气溶胶或微生物均匀分散。

    （2）吸取上述含菌液体吸收液1mL与融化冰冷却到45℃左右的营养液琼脂做倾注培养，同时做三个平行试验，置37℃恒温箱中培养48h，计算平均菌落数。根据下列公式计算

    式中X—每1m?空气中的细菌数；

    式中Vs—吸收液体量，mL；

    式中Va—空气过滤量，L；

    式中N—每1mL液体培养基中的细菌数。

    微生物检测方法四：简易定量测定法

    用无菌注射器定量抽取空气，将所取空气压入培养基内部，经培养后，即可定量、定性测定空气中微生物，此法简单易行。

    （1）将无菌固体培养基融化后，在50℃水浴中保温备用。

    （2）利用50~100mL无菌注射器抽取待测环境空气20~100mL。

    （3）在无菌操作下，取已融化培养基倒入无菌平皿中，平皿稍作倾斜，将注射器插入培养基深处，缓慢将空气压入培养基内，轻轻摇匀以消除气泡。待培养基凝固，置于30℃恒温箱中培养3d后统计菌落数量，推算1L空气所含菌量。通过菌落形态定性微生物，如统计霉菌数量时培养的时间稍许延长。应用此法需多做平行试验，求其平均值以提高准确性。